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多肽純度的定義及含量

更新時間:2013-04-17   點擊次數:2771次

多肽純度的定義
多肽的純度通常是通過HPLC,用每分鐘1%的標準乙腈梯度來檢測決定的。合成過程中,氨基酸之間的交聯效率不是總能達到100%,因而產生一系列的氨基酸缺失的雜質。大多數這樣的氨基酸缺失的雜質在純化過程中都被去掉了,但有少數的雜質其色譜表現與目標多肽很相近。這些氨基酸缺失的雜質肽留在了多肽樣品中就構成了余下的幾個百分點。

多肽的凈含量
干品多肽的重量中不僅僅包含多肽,還包含有一些非肽的組份,如水,被吸收的溶劑、配位離子和鹽等。肽的凈含量是指肽在其中的重量百分比,這個百分比的數值范圍很大,可能從50%到90%,取決于純度、序列以及合成和純化的方法,不要將肽的凈含量和肽的純度混為一談,它們是*不同的兩個概念。純度通常是由HPLC決定的。純度定義的是多肽樣品中含正確序列的組分的百分比,而肽的凈含量是指樣品中肽類物質相對于總物質所占的百分比,肽的凈含量通常是用氨基酸組分分析或紫外分光法測定的。這個信息主要是在一些對肽的濃度很敏感的實驗中,對計算肽的濃度是很重要的。

MAP的應用   ELISA試劑盒價格

MAP是復合抗原多肽,是將線型多肽的C端連接在多聚Lys核心上形成的分枝多肽,從而增大了整個分子的大小。雖然MAP減少了多肽與KLH交聯的步驟,然而由于MAP多肽的構象活動空間有限,通過它產生的抗體與通過KLH交聯法產生的抗體相比常常不能被蛋白識別。再者,做MAP時沒有自由的肽產生,因而很難除去對多聚Lys核心部分產生的抗體。HPLC純化MAP很困難。而且由于MAP分子的不均一性和很大的分子大小,也不能提供質譜鑒定。

                 




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