ELISA試驗中為什么要避免產(chǎn)生氣泡

                    ELISA試驗中為什么要避免產(chǎn)生氣泡

通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應不均一。

包被時有氣泡的話，將導致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。

封閉時有氣泡的話，將導致大量未結(jié)合位點的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽性。

加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。

加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性（競爭法相反----假陽性）。

加顯色液時有氣泡的話--－顯色不*。

加終止液時有氣泡的話，1。不能*終止反應 2。影響酶標儀比色，OD值增高

洗滌時有氣泡的話，非特異性結(jié)合物不能*洗去，做無用功。

避免方法：

1。加樣時盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過快過猛。

2。封閉時一定要加滿孔，

3。洗滌時一定要加滿孔(重要），氣泡會浮上來zui終驅(qū)除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。