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Elisa實驗稀釋問題解析方案

更新時間:2015-07-21   點擊次數:906次

    本月初時,南京中醫藥大學的張老師第二次購買了我司進口人Elisa試劑盒產品,上次實驗在上海恒遠生物公司技術員的指導下順利完成,張老師對我司產品與服務都非常滿意。而本次實驗中,張老師遇到了一些問題,到何咨詢。

    張老師說:“我在網上看到一些帖子說是通過抗原濃度,抗體的稀釋倍數,設立梯度來確定效果,可是我想問測的的結果怎么看哪個效果好呢?看了一篇文獻他是說OD450值為1左右條件作為*條件,很是不解啊,我做的雙抗夾心法。" 

    聽完張老師的問題描述后,何立即將問題轉至技術部。二十分鐘后,技術員將問題解析方案整理出:這個確實有好幾種因素來確定,雙抗夾心的話,有包被抗體的濃度、緩沖液的選擇、孵育時間等好幾種因素,您要測試*的效果,就要控制變量的方法來確定。

    一般來說,如果您是夾心法的話主要要用棋盤法確定一抗和抗原的濃度,二抗一般不需要怎么摸條件,您選一到兩個說明書上推薦的濃度即可。棋盤法中選OD值在1左右的一抗濃度,(此時,應該有多個1對應的濃度)您要選一個在這個濃度下,測抗原的線性拉得zui寬的那一個。如果一抗濃度太高,想要測的抗原基本都可被吸附,這樣就達不到靈敏檢測的目的;如果一抗濃度太低,OD值比1小太多又會增大誤差。另外,抗體稀釋液一般就是在洗滌液中加入一定濃度的不相關蛋白。這樣可以減小非特異吸附(吐溫和蛋白均有此作用),直接用PBS的話可能會造成陰性OD過高

    問題解決后,張老師非常滿意,并表示下學期有新的實驗課題要做,還會繼續來買。非常感謝南京中醫藥大學張老師對上海恒遠生物公司的鼎力支持與認可!我們會竭誠為每一位客戶提供的產品與服務。




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