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淺談ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍

更新時間:2016-09-05   點擊次數:1166次

  近二十幾年來,免疫學分析方法發展突飛猛進,尤其是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后,使原來許多經典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技術之后,在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。由于酶的生物催化作用,一個酶分子在數分鐘內可以催化幾十幾百個底物分子發生反應,產生了放大作用,使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數分鐘后就可被識別出來,這種技術被稱為酶聯免疫吸附試驗法(簡稱ELISA法)。
基本原理:
   ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合,此種結合不會改變抗體的免疫學特性,也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型,出現顏色反應。因此,可通過底物的顏色反應來判定有無相應的免疫反應,顏色反應的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應可通過ELISA檢測儀進行定量測定,這樣就將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來,使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。 
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。 
2.研究抗酶抗體的合成。 
3.顯現微量的免疫沉淀反應。 
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。 
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